切萨皮克与俄亥俄铁路（英文：Chesapeake and Ohio Railway）是美国的一级铁路公司，成立于1869年。其营运范围在1873年由维吉尼亚州首府里奇蒙拓展至俄亥俄河流域，地属西维吉尼亚州的亨廷顿。该城命名乃来自切萨皮克与俄亥俄铁路的领导人C. P. Huntington。

切萨皮克与俄亥俄铁路的半岛支线将西维吉尼亚州的煤矿运输到汉普顿锚地的港口，新的城市纽波特纽斯于焉诞生。煤矿的需求也使得其铁路线延展到美国中西部，抵达俄亥俄州的哥伦布、辛辛那提、托雷多，以及伊利诺州的芝加哥。

切萨皮克与俄亥俄铁路的总部至1960年代早期乃位于克里夫兰。1972年切萨皮克与俄亥俄铁路与巴尔的摩与俄亥俄铁路以及西马里兰铁路逐步合并成 切西系统。之后切西系统又与海岸铁路系统合并，成为CSX运输。 1999年又纳入了联合铁路近半的路线系统与资产。

The Chesapeake and Ohio Railway (reporting marks C&O, CO) was a Class I railroad formed in 1869 in Virginia from several smaller Virginia railroads begun in the 19th century. Led by industrialist Collis P. Huntington, it reached from Virginia's capital city of Richmond to the Ohio River by 1873, where the railroad town (and later city) of Huntington, West Virginia was named for him.